大鼠ELISA試劑盒運用的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化,將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的辦法顯現(xiàn)出來。
固相吸附蛋白對錯特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才華,為了確??乖贵w反應(yīng)的特異性,因而被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。酶可以通過共價鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時分,被檢測靶方針中也結(jié)合了酶分子。
大鼠ELISA試劑盒該還具有以下特性:
特異性:大鼠ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對有關(guān),若抗體對中為多抗,另一個有必要為單抗,建議運用雙單抗;
簡便性:在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實驗時間越短,操作越便利,越簡略遭到用戶等候,這也無妨作為選擇試劑盒的一個方針;
簡易:以簡略的一步反應(yīng)取代慣例法的五個進程;
通用:適合于絕大多數(shù)一級抗體,并且不需要二級抗體反應(yīng);
便利:以1個小時取代慣例法的3-5個小時;
活絡(luò):具有與慣例法相似的活絡(luò)度;
重現(xiàn)性好:實驗成果重現(xiàn)性好;
經(jīng)濟:抗體和試劑可重復(fù)運用4-5次。
結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促進底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測人員可以裸眼查詢,可以通過顏色來斷定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判別標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在恰當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
將抗原抗體反應(yīng)固相化,即實驗中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不損壞蛋白分子結(jié)構(gòu),堅持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性。
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