豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血清白蛋白(HSA)的豬脂蛋白α,ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利,往往還更加。
ELISA試劑盒可用目測定性,也可用酶標(biāo)測定儀測定光密度(OD)值以反映抗原含量,靈敏度可達(dá)每毫升納克(ng)水平甚至皮克(Pg)水平。常用于標(biāo)記的酶有辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)等。豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒如何選擇?
現(xiàn)在市面上的豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢?首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測的分子進(jìn)行檢測,除此以外也還有一些需要加以考量的因素。
1. 抗體類型:單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA,實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點(diǎn),為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了沖突,就會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。要避免這一問題,我們可以選擇購買“matched pair”的捕獲/檢測抗體對,這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗(yàn)證才推薦的好組合。
通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn),雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。不過有時(shí)候雙抗夾心法并不是*選擇,例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著,又或者抗體只有一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下,競爭性ELISA就更為適用,這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競爭,以結(jié)合捕獲抗體。
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