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96T人氧化低密度脂蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒內(nèi)容及其配制
更新時(shí)間:2012-12-07   點(diǎn)擊次數(shù):839次

 

 


上海信然生物技術(shù)有限公司ELISA試劑盒試劑盒專賣商貿(mào)專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對(duì)試劑盒質(zhì)量100%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換

人氧化低密度脂蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
試驗(yàn)原理:
ox-LDL試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知ox-LDL濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將ox-LDL和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ox-LDL的濃度呈比例關(guān)系。

 

自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人氧化低密度脂蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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人氧化低密度脂蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空轉(zhuǎn)移趨化生長(zhǎng)因子β1孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。


6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人氧化低密度脂蛋白ELISA 檢測(cè)試劑盒
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的ox-LDL標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的ox-LDL含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測(cè)值范圍:0-400mmol/L

4、敏感度: 1.0 mmol/L

Cesium sulfate 硫酸銫 [10294-54-9] 100g
Cetylpyridinium chloride, monohydrate 氯化十六烷基吡啶一水 [6004-24-6] 100g
Cetylpyridinium chloride, monohydrate 氯化十六烷基吡啶一水 [6004-24-6] 500g
CHAPS 3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 [75621-03-3] 1g
CHAPS 3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 [75621-03-3] 5g
CHAPSO 3-[(3-膽固醇氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 [82473-24-3] 1g
CHAPSO 3-[(3-膽固醇氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 [82473-24-3] 5g
Chlorogenic acid 綠原酸 [327-97-9] 1g
4-Chloro-1-naphthol 4-氯-1-萘酚 [604-44-4] 10g
Charcoal active 狀 [7440-44-0] 1kg
Charcoal active 顆粒 [7440-44-0] 1kg
Chenodeoxycholic acid, free acid 鵝去氧膽酸 [474-25-9] 5g
CHES 2-環(huán)已胺基乙磺酸 [103-47-9] 250g
Poly-(1,4-b-D-glucopyranosamine Chitosan 殼聚糖 [9012-76-4] 100g
Poly-(1,4-b-D-glucopyranosamine Chitosan 殼聚糖 [9012-76-4] 500g
Chloral hydrate 水合氯醛 [302-17-0] 250g
Chloral 三氯乙醛 [75-87-6] 100ml
alpha-Chloralose α-葡萄糖縮氯醛 [15879-93-3] 100g
Chloramine T, trihydrate 氯銨-T三水 [7080-50-4] 500g
a-Chymotrypsin a-胰凝乳蛋白酶 / 250mg
trans-Cinnamaldehyde 肉桂醛 [14371-10-9] 250ml
Chloramphenicol 氯霉素 [56-75-7] 100g
Chlorhexidine diacetate salt hydrate 醋酸洗必泰 [56-95-1] 25g
2-Chloroacetamide 2-氯乙酰胺 [79-07-2] 50g


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